eng
Бактериальная клетка - практически минимальная форма живого организма. Ее размер не превышает нескольких микронов. Такая клетка во много раз меньше любого созданного человеком искусственного устройства, способного к перемещению в пространстве или организации химических реакций.
Бактерии можно считать практически идеальным объектом для зондовой микроскопии. Их микронные размеры позволяют легко наблюдать как бактериальные клетки и сформированные ими колонии целиком, так и детально изучать отдельные фрагменты клеток [1]. Бактериальные клетки имеют жесткий полимерный каркас, поэтому не претерпевают деформаций при сканировании их поверхности зондом микроскопа. Для наблюдения бактерий на воздухе процедура приготовления тривиально проста - выращенные на питательной среде клетки переносят в дистиллированную воду до достижения концентрации около 109/мл. Каплю объемом в несколько микролитров помещают на поверхность свежесколотой слюды. Вода смачивает этот материл, образую на нем тонкую пленку. После испарения воды или ее удаления с помощью промокательной бумаги на подложке осаждаются одиночные клетки или формируются монослойные покрытия. (Экспериментально показано, что краткосрочное помещение бактерий в дистиллированную воду не приводит к их разрушению - лизису.)
Атомно-силовая микроскопия (АСМ) позволяет получать трехмерные изображения бактериальных клеток (рис.1, 2), и ее данные могут служить дополнительным информативным критерием при составлении определителей бактерий.
При наблюдении в жидкости контраст получаемых изображений падает, что естественно и объясняется наличием подвижных полимерных цепей наружной мембраны. Изображение бактериальных клеток E.coli в буферном растворе приведено на рис.3 [1].
АСМ позволяет надежно зарегистрировать структурные изменения, происходящие на поверхности наружной мембраны клеточной стенки. На рис.4а представлены изображения родительской бактерии Escherichia coli, изображение (рис.4б) соответствует генно-модифицированной бактерии: в ДНК исходной бактерии был вставлен ген rfb-a3,4, отвечающий за синтез О-специфических боковых цепей липополисахаридов, которые на поверхности клетки создают ламелярную структуру, по общей морфологии существенно отличную от структуры поверхности исходной родительской клетки [2].
Автор выражает благодарность за поддержку Рособразованию (П255) и Программе НАТО "Наука для мира" (CBN.NR.NRSFP 983204) и РФФИ (10-04-01574-а и 10-02-06030-г).
ЛИТЕРАТУРА
1. Bolshakova A.V., Kiselyova O.I., Filonov A.S.,
Frolova O.Yu., Lyubchenko Yu.L. and Yaminsky I.V. Comparative studies of bacteria with atomic force microscopy operating in different modes - Ultramicroscopy, 2001, 68 (1-2), 121-128.
2. Yaminsky I.V., Demin V.V., Bondarenko V.V., The differences in cellular surface of hybrid bacteria Escherichia coli K12, inheriting rfb-а3,4 gene of Shigella flexneri as revealed by atomic force microscopy. - J. microbiology, epidemiology, and immunology, 1997, № 6, 15-18.
Атомно-силовая микроскопия (АСМ) позволяет получать трехмерные изображения бактериальных клеток (рис.1, 2), и ее данные могут служить дополнительным информативным критерием при составлении определителей бактерий.
При наблюдении в жидкости контраст получаемых изображений падает, что естественно и объясняется наличием подвижных полимерных цепей наружной мембраны. Изображение бактериальных клеток E.coli в буферном растворе приведено на рис.3 [1].
АСМ позволяет надежно зарегистрировать структурные изменения, происходящие на поверхности наружной мембраны клеточной стенки. На рис.4а представлены изображения родительской бактерии Escherichia coli, изображение (рис.4б) соответствует генно-модифицированной бактерии: в ДНК исходной бактерии был вставлен ген rfb-a3,4, отвечающий за синтез О-специфических боковых цепей липополисахаридов, которые на поверхности клетки создают ламелярную структуру, по общей морфологии существенно отличную от структуры поверхности исходной родительской клетки [2].
Автор выражает благодарность за поддержку Рособразованию (П255) и Программе НАТО "Наука для мира" (CBN.NR.NRSFP 983204) и РФФИ (10-04-01574-а и 10-02-06030-г).
ЛИТЕРАТУРА
1. Bolshakova A.V., Kiselyova O.I., Filonov A.S.,
Frolova O.Yu., Lyubchenko Yu.L. and Yaminsky I.V. Comparative studies of bacteria with atomic force microscopy operating in different modes - Ultramicroscopy, 2001, 68 (1-2), 121-128.
2. Yaminsky I.V., Demin V.V., Bondarenko V.V., The differences in cellular surface of hybrid bacteria Escherichia coli K12, inheriting rfb-а3,4 gene of Shigella flexneri as revealed by atomic force microscopy. - J. microbiology, epidemiology, and immunology, 1997, № 6, 15-18.
Отзывы читателей
