eng
Выпуск #7-8/2020
З.С.Плиева, Т.А.Смирнова, М.В.Зубашева, Ю.А.Смирнов, В.Г.Жуховицкий, А.И.Ахметова, И.В.Яминский
Структура выростов спор bacillus cereus
Структура выростов спор bacillus cereus
Просмотры: 2654
DOI: 10.22184/1993-8578.2020.13.7-8.458.464
Bacillus cereus повсеместно распространенный вид бацилл. Известно, что B. cerеus является причиной различных заболеваний, главным образом связанных с поражением желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) с симптомами диареи и рвоты. В. cerеus может быть этиологическим агентом менингита, перикардита, пневмонии, заболевания глаз, сопутствовать раневым инфекциям. Приведены новые данные о структуре выростов бактерий B. cerеus на основании экспериментальных данных, полученных с помощью просвечивающей электронной микроскопии и компьютерного анализа изображений.
Bacillus cereus повсеместно распространенный вид бацилл. Известно, что B. cerеus является причиной различных заболеваний, главным образом связанных с поражением желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) с симптомами диареи и рвоты. В. cerеus может быть этиологическим агентом менингита, перикардита, пневмонии, заболевания глаз, сопутствовать раневым инфекциям. Приведены новые данные о структуре выростов бактерий B. cerеus на основании экспериментальных данных, полученных с помощью просвечивающей электронной микроскопии и компьютерного анализа изображений.
Теги: bacilli bacillus cereus exosporium image analysis споровые выросты morphology spore appendages spores transmission electron microscopy анализ изображений бациллы морфология просвечивающая электронная микроскопия споры экзоспориум
З.С.Плиева1, мл. науч. сотр., (ORCID: 0000-0001-9765-8623), Т.А.Смирнова1, д.б.н., вед. науч. сотр., (ORCID: 0000-0001-7121-635Х), М.В.Зубашева1, к.б.н., науч. сотр., (ORCID: 0000-0001-7330-7343), Ю.А.Смирнов1, д.м.н., проф., вед. науч. сотр., (ORCID: 0000-0002-2215-5420), В.Г.Жуховицкий1, к.м.н., руководитель лаборатории, (ORCID: 0000-0002-4653-2446), А.И.Ахметова 2, 3, инженер НИИ ФХБ имени А.Н.Белозерского МГУ, ведущий специалист Центра перспективных технологий и Энергоэффективных технологий (ORCID: 0000-0002-5115-8030), И.В.Яминский2, 3, 4, д.ф.-м.н., проф. физического и химического факультетов МГУ имени М.В.Ломоносова, вед. научн. сотр. ИНЭОС РАН, директор Энергоэффективных технологий, (ORCID: 0000-0001-8731-3947) / yaminsky@nanoscopy.ru
Z.S.Plieva1, Junior Researcher, T.A.Smirnova1, Doct. of Sc. (Biology), Leading Scientist, М.V.Zubasheva1, Cand. of Sci. (Biology), Researcher, Yu.A.Smirnov1, Doct. of Sc. (Medicine), Prof., Leading Scientist, V.G.Zhukovitskiy1, Cand. of Sc. (Medicine), Head of Laboratory, A.I.Akhmetova2, 3, Engineer of A.N. Belozersky Institute of Physico-Chemical Biology, Leading Specialist of Advanced Technologies Center and of Energy Efficient Technologies, I.V.Yaminskiy,2, 3, 4, Doct. of Sc. (Physics and Mathematics), Prof. of Lomonosov Moscow State University, Physical and Chemical departments, Director of Energy Efficient Technologies, Leading Sci. of INEOS RAS
DOI: 10.22184/1993-8578.2020.13.7-8.458.464
Получено: 8.11.2020 г.
Важной характеристикой бацилл является способность к спорообразованию. Споры представляют собой одну из самых устойчивых форм существования бактерий. Значение спор обусловлено их термостабильностью, УФ резистентностью, устойчивостью к различным факторам внешней среды. В связи с этим споры представляют опасность для пищевой промышленности и медицины. В настоящее время изучена морфология большинства спорообразующих бактерий. Наряду с базовыми признаками, характерными для определенного вида, у ряда штаммов обнаруживаются свойства, зависящие от источника выделения. Неодинаковыми по своим характеристикам могут быть и штаммы B. cerеus, выделенные из окружающей среды, пищевых продуктов и полученные от больных. Морфологические особенности бацилл проявляются на стадии спорообразования. Споры разных видов и штаммов имеют отличительные признаки, отсутствующие у вегетативных клеток.
Споры В. cereus имеют специфические структуры, отсутствующие у вегетативных клеток. Характерным признаком спор группы B. cereus является наличие длинных споровых выростов на поверхности экзоспориума, подобных пилям грамотрицательных бактерий. Hodgikiss [2] сообщил, что штаммы B. cereus имеют филаментозные выросты на спорах, а споры Bacillus alcalophilus, Bacillus licheniformis, Bacillus megalerium, Bacillus polymyxa и Bacillus megaterium лишены экзоспориума и выростов.
DesRosier, Lara [3] показали, что у B. cereus имеются выросты, аналогичные пилям диаметром 6,8 нм и вариабельной длиной. Они имеют белковую природу и отличаются высокой стабильностью. С помощью меченых антител было показано наличие общих антигенов у пилей и экзоспориума. Споровые выросты различных морфологических типов были найдены Смирновой с соавторами у B. thuringiensis [4].
Недавно были обнаружены споровые протеиновые филаментозные выросты двух морфологических типов у B. cereus [5]. Авторы нашли споровые выросты (endospore appendages (Enas)) у штамма B. cereus NVH 0075-95, вызывающего пищевые отравления. Было показано, что Enas представляют собой новый класс пилей грамположительных бактерий, специфичных для спор. Enas стабилизированы благодаря дисульфидным связям, в результате чего гибкие пили становятся термоустойчивыми, нечувствительными к высыханию и химическим повреждениям.
Выросты спор вызывают интерес в связи с выявленной у них адгезивной способностью. Споры благодаря наличию выростов могут прикрепляться к биологическим и инертным поверхностям, значимым для медицины и пищевой промышленности. Адгезивная способность спор и их пилированность варьируются от штамма к штамму и достигают максимума у споры с длинными выростами [6].
Представляется интересным изучить особенности выростов у штаммов B. cereus различного происхождения для оценки способности спор прикрепляться к оборудованию, используемому в различных отраслях промышленности и медицины. Данные о строении и свойствах споровых выростов важны для выбора метода борьбы со спорообразующими бактериями. В настоящее время исследуются особенности спиралеподобной укладки субъединиц споровых выростов B. cereus – наноструктур, специфичных для спор.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Материалы исследования – штаммы B. cereus, номера и источники выделения, а также среды, на которые был сделан высев. В работе использовали референсный штамм NCTC 8035, природные (137 \ 0719, 114 / 0719, 115 \ 079, 131 \ 079) и клинические изоляты B. cereus. Штаммы выращивали на агаризованном питательном бульоне LB при 28 °С в течение 12–96 ч. Клинические изоляты были получены из просветных фекалий пациентов с язвенным колитом (ЯК) в Государственном научном центре колопроктологии им. А.Н.Рыжих Минздрава России, обозначенные как B. сerеus SCCC 1208 и B. cerеus SCCC 19/16.
Исследовали также следующие штаммы: штамм B. cereus 169, выделенный из отделяемого брюшной полости у больного с ЯК; штамм B. cereus 177, выделенный из просветных фекалий; штамм B. cereus 172, выделенный из просветных фекалий; штамм B. cereus 214 / 18, выделенный из операционной раны пациента с ЯК; штамм B. cereus 239 / 18, выделенный из крови пациента с ЯК и подтвержденным диагнозом сепсиса; штамм B. cereus 223 / 18, выделенный из брюшной полости пациента с ЯК; штамм B. cereus 181, выделенный из операционной раны пациента с ЯК. Среда выращивания – кровяной агар. Штаммы пересевали на твердую питательную среду NBY и выращивали при 30 °С.
ПРОСВЕЧИВАЮЩАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ МИКРОСКОПИЯ
Бактерии через 96 ч культивирования смывали с плотной питательной среды, отмывали дистиллированной водой и фиксировали формалином. Для изучения спор методом негативного контрастирования суспензию спор наносили на медные сетки, покрытые формваровой пленкой, окрашивали 1%-ным водным раствором уранилацетата и 2%-ным водным раствором молибдата аммония.
Негативно окрашенные споры изучали в электронном микроскопе JEM 2100 (Jeol, Japan) при ускоряющем напряжении 100 кВ.
Количественный анализ полученных данных был проведен с помощью программного обеспечения "ФемтоСкан Онлайн" [7, 8]. Для определения степени гибкости выростов нами проведено измерение персистентной длины, широко используемое при изучении механики макромолекул [9]. Оценочное значение персистентной длины Lp определялось также по приближенной формуле Lp ~ R2/L, где L – контурная длина полимерной цепи (выроста), R – расстояние между концами полимерной цепи (выроста).
РЕЗУЛЬТАТЫ
Было проведено электронно-микроскопическое изучение спор штаммов B. cereus методом негативного контрастирования.
Как видно из представленных изображений просвечивающей электронной микроскопии, при негативном контрастировании наблюдаются экзоспориум в виде электронно-прозрачного мешка (рис.1), окружающего спору, и споровые выросты (рис.2). Численность и длина споровых выростов зависят от принадлежности к штамму (рис.3). Длина выростов варьируется, достигая 11 мкм, диаметр около 9–10 нм. При большом увеличении видно, что они различаются по морфологии. Обнаружены крупные трубчатые выросты, внутри которых имеется канал. На изображениях просвечивающей электронной микроскопии заметно, что канал заполнен контрастером. При большом увеличении выявляется спиралевидная укладка (рис.3a). На некоторых снимках выросты контактируют друг с другом. Кроме трубчатых, наблюдаются более тонкие гибкие выросты. Выросты берут начало от экзоспориума, но, возможно, и от оболочки. Они распределяются по отдельности либо пучками.
Количественный анализ полученных изображений спор показал, что выросты длиной около 1 мкм имеют, как правило, вид прямолинейных стержней. На длинных выростах длиной 1–5 мкм заметна небольшая изогнутость. Полученное значение персистентной длины составляет 6±0,9 мкм. Рассчитанное значение персистентной длины указывает, что выросты являются жесткой полимерной цепью. Следует заметить, что, несмотря на применяемую процедуру приготовления образцов, включающую нанесение на твердую подложку, высушивание и вакуумирование, практически все выросты имеют целостный характер, без видимых повреждений. В поле зрения вблизи бактерий отдельные изолированные от бактерий фрагменты выростов не обнаруживаются или наблюдается их незначительное количество, что указывает на высокую стабильность выростов. Разрушения выростов в процессе приготовления образцов и при последующем наблюдении в электронном микроскопе практически не происходило. Выросты идут непосредственно от края споры бактерии на удаление в 1–10 мкм. Эти факты также указывают на высокую механическую прочность выростов. Наблюдаемый диаметр канала выростов составляет величину около 1,5 нм.
Шаг спиралевидной упаковки – около 4 нм, наблюдаемый угол поворота спирали около 77 град., что соответствует углу поворота спирали по отношению к плоскости поперечного сечения в 13 град. При шаге спирали в 4 нм и диаметре выроста около 9 нм расчетное значение угла спирали также получается около 13 град. (рис.4c).
Согласно полученным данным, ранее неизученные штаммы B. cereus имеют типичные для этих бацилл споровые выросты. Эти штаммы различаются по количеству споровых выростов. Наименьшее количество выростов характерно для природных штаммов. Клинические изоляты имеют больше споровых выростов. Пилированность спор клинических изолятов выражена у разных штаммов по-разному. Преобладают тубулярные выросты.
Ранее мы показали, что у энтомопатогенных бацилл, родственных B. cereus, выросты этого типа ответственны за адгезию к эритроцитам и вызывают реакцию гемагглютинации [10]. Вероятно, что у B. cereus эти структуры выполняют сходную функцию.
Полученные результаты данной работы свидетельствуют о прочности выростов, что характерно для споровых структур. Устойчивость выростов к внешним воздействиям, очевидно, затрудняет процедуру очистки объектов окружающей среды от спор. Наряду с практической значимостью изучение выростов важно для понимания особенностей сборки и организации пилей грамположительных бактерий – нового класса наноструктур.
Работа Яминского И.В. выполнена при финансовой поддержке Российского научного фонда (проект № 20-12-00389), работа Ахметовой А.И. – при финансовой поддержке Российского фонда фундаментальных исследований (проекты № 20-32-90036 и № 21-58-10005).
ЛИТЕРАТУРА / REFERENCES
Bottone E.J. Bacillus cereus, a volatile human pathogene. Clinic. microbiol. reviews.; 23 (2010), pp. 382–398.
Hodgikiss W. 1971. Filamentous appendages on the spores and exosporium of certain Bacillus species, pp. 211–218. In A. Barker G. Gould, and J. Wolf (ed.), Spore research 1971. Academic Press, Inc., London, England.
DesRosier J.P., Lara J.C. Isolation and properties of pili from spores of Bacillus cereus. J. of Bacteriol. 145(1), (1981), pp. 613–619.
Smirnova T.A., Kulinich L.I., Galperin M.Yu., Azizbekyan R.R. Morphological characteristics and adhesive properties of Bacillus thuringiesis spore appendages. Mikrobiologiya. 58(5), (1989), pp. 835–840.
Pradhan B., Liedtke J., Sleutel M., Lindbäck T.L., Llarena A., Brynildsrud O., Aspholm M., Remaut H. Bacillus endospore appendages form a novel family of disulfide-linked pili. BioRxiv preprint (2020). doi: https://doi.org/10.1101/2020.08.21.260141.
Tauveron G., Slomianny C., Henry C., Faille C. Variability among Bacillus cereus strains in the spore surface properties and influence on their ability to contaminate food surface equipment. Int. J. Food Microbiol.110 (2006), pp. 254–262.
Akhmetova A.I., Yaminsky I.V. FemtoScan Online software for solving problems in biology and medicine. Medicine and High Technologies. No. 1, (2019), pp. 16–22, http://nanoscopy.ru/software/femtoscan_online/
Гросберг А.Ю., Хохлов А.Р. Статистическая физика макромолекул. М.: Наука, 1989.
Smirnova T.A., Kulinich L.I., Galperin M.Yu., Azizbekyan R.R. Subspecies-specific haemagglutination patterns of fimbriated bacillus thuringiensis spores. FEMS Microbiology Letters. 90 (1991), p. 1.
Z.S.Plieva1, Junior Researcher, T.A.Smirnova1, Doct. of Sc. (Biology), Leading Scientist, М.V.Zubasheva1, Cand. of Sci. (Biology), Researcher, Yu.A.Smirnov1, Doct. of Sc. (Medicine), Prof., Leading Scientist, V.G.Zhukovitskiy1, Cand. of Sc. (Medicine), Head of Laboratory, A.I.Akhmetova2, 3, Engineer of A.N. Belozersky Institute of Physico-Chemical Biology, Leading Specialist of Advanced Technologies Center and of Energy Efficient Technologies, I.V.Yaminskiy,2, 3, 4, Doct. of Sc. (Physics and Mathematics), Prof. of Lomonosov Moscow State University, Physical and Chemical departments, Director of Energy Efficient Technologies, Leading Sci. of INEOS RAS
DOI: 10.22184/1993-8578.2020.13.7-8.458.464
Получено: 8.11.2020 г.
Важной характеристикой бацилл является способность к спорообразованию. Споры представляют собой одну из самых устойчивых форм существования бактерий. Значение спор обусловлено их термостабильностью, УФ резистентностью, устойчивостью к различным факторам внешней среды. В связи с этим споры представляют опасность для пищевой промышленности и медицины. В настоящее время изучена морфология большинства спорообразующих бактерий. Наряду с базовыми признаками, характерными для определенного вида, у ряда штаммов обнаруживаются свойства, зависящие от источника выделения. Неодинаковыми по своим характеристикам могут быть и штаммы B. cerеus, выделенные из окружающей среды, пищевых продуктов и полученные от больных. Морфологические особенности бацилл проявляются на стадии спорообразования. Споры разных видов и штаммов имеют отличительные признаки, отсутствующие у вегетативных клеток.
Споры В. cereus имеют специфические структуры, отсутствующие у вегетативных клеток. Характерным признаком спор группы B. cereus является наличие длинных споровых выростов на поверхности экзоспориума, подобных пилям грамотрицательных бактерий. Hodgikiss [2] сообщил, что штаммы B. cereus имеют филаментозные выросты на спорах, а споры Bacillus alcalophilus, Bacillus licheniformis, Bacillus megalerium, Bacillus polymyxa и Bacillus megaterium лишены экзоспориума и выростов.
DesRosier, Lara [3] показали, что у B. cereus имеются выросты, аналогичные пилям диаметром 6,8 нм и вариабельной длиной. Они имеют белковую природу и отличаются высокой стабильностью. С помощью меченых антител было показано наличие общих антигенов у пилей и экзоспориума. Споровые выросты различных морфологических типов были найдены Смирновой с соавторами у B. thuringiensis [4].
Недавно были обнаружены споровые протеиновые филаментозные выросты двух морфологических типов у B. cereus [5]. Авторы нашли споровые выросты (endospore appendages (Enas)) у штамма B. cereus NVH 0075-95, вызывающего пищевые отравления. Было показано, что Enas представляют собой новый класс пилей грамположительных бактерий, специфичных для спор. Enas стабилизированы благодаря дисульфидным связям, в результате чего гибкие пили становятся термоустойчивыми, нечувствительными к высыханию и химическим повреждениям.
Выросты спор вызывают интерес в связи с выявленной у них адгезивной способностью. Споры благодаря наличию выростов могут прикрепляться к биологическим и инертным поверхностям, значимым для медицины и пищевой промышленности. Адгезивная способность спор и их пилированность варьируются от штамма к штамму и достигают максимума у споры с длинными выростами [6].
Представляется интересным изучить особенности выростов у штаммов B. cereus различного происхождения для оценки способности спор прикрепляться к оборудованию, используемому в различных отраслях промышленности и медицины. Данные о строении и свойствах споровых выростов важны для выбора метода борьбы со спорообразующими бактериями. В настоящее время исследуются особенности спиралеподобной укладки субъединиц споровых выростов B. cereus – наноструктур, специфичных для спор.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Материалы исследования – штаммы B. cereus, номера и источники выделения, а также среды, на которые был сделан высев. В работе использовали референсный штамм NCTC 8035, природные (137 \ 0719, 114 / 0719, 115 \ 079, 131 \ 079) и клинические изоляты B. cereus. Штаммы выращивали на агаризованном питательном бульоне LB при 28 °С в течение 12–96 ч. Клинические изоляты были получены из просветных фекалий пациентов с язвенным колитом (ЯК) в Государственном научном центре колопроктологии им. А.Н.Рыжих Минздрава России, обозначенные как B. сerеus SCCC 1208 и B. cerеus SCCC 19/16.
Исследовали также следующие штаммы: штамм B. cereus 169, выделенный из отделяемого брюшной полости у больного с ЯК; штамм B. cereus 177, выделенный из просветных фекалий; штамм B. cereus 172, выделенный из просветных фекалий; штамм B. cereus 214 / 18, выделенный из операционной раны пациента с ЯК; штамм B. cereus 239 / 18, выделенный из крови пациента с ЯК и подтвержденным диагнозом сепсиса; штамм B. cereus 223 / 18, выделенный из брюшной полости пациента с ЯК; штамм B. cereus 181, выделенный из операционной раны пациента с ЯК. Среда выращивания – кровяной агар. Штаммы пересевали на твердую питательную среду NBY и выращивали при 30 °С.
ПРОСВЕЧИВАЮЩАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ МИКРОСКОПИЯ
Бактерии через 96 ч культивирования смывали с плотной питательной среды, отмывали дистиллированной водой и фиксировали формалином. Для изучения спор методом негативного контрастирования суспензию спор наносили на медные сетки, покрытые формваровой пленкой, окрашивали 1%-ным водным раствором уранилацетата и 2%-ным водным раствором молибдата аммония.
Негативно окрашенные споры изучали в электронном микроскопе JEM 2100 (Jeol, Japan) при ускоряющем напряжении 100 кВ.
Количественный анализ полученных данных был проведен с помощью программного обеспечения "ФемтоСкан Онлайн" [7, 8]. Для определения степени гибкости выростов нами проведено измерение персистентной длины, широко используемое при изучении механики макромолекул [9]. Оценочное значение персистентной длины Lp определялось также по приближенной формуле Lp ~ R2/L, где L – контурная длина полимерной цепи (выроста), R – расстояние между концами полимерной цепи (выроста).
РЕЗУЛЬТАТЫ
Было проведено электронно-микроскопическое изучение спор штаммов B. cereus методом негативного контрастирования.
Как видно из представленных изображений просвечивающей электронной микроскопии, при негативном контрастировании наблюдаются экзоспориум в виде электронно-прозрачного мешка (рис.1), окружающего спору, и споровые выросты (рис.2). Численность и длина споровых выростов зависят от принадлежности к штамму (рис.3). Длина выростов варьируется, достигая 11 мкм, диаметр около 9–10 нм. При большом увеличении видно, что они различаются по морфологии. Обнаружены крупные трубчатые выросты, внутри которых имеется канал. На изображениях просвечивающей электронной микроскопии заметно, что канал заполнен контрастером. При большом увеличении выявляется спиралевидная укладка (рис.3a). На некоторых снимках выросты контактируют друг с другом. Кроме трубчатых, наблюдаются более тонкие гибкие выросты. Выросты берут начало от экзоспориума, но, возможно, и от оболочки. Они распределяются по отдельности либо пучками.
Количественный анализ полученных изображений спор показал, что выросты длиной около 1 мкм имеют, как правило, вид прямолинейных стержней. На длинных выростах длиной 1–5 мкм заметна небольшая изогнутость. Полученное значение персистентной длины составляет 6±0,9 мкм. Рассчитанное значение персистентной длины указывает, что выросты являются жесткой полимерной цепью. Следует заметить, что, несмотря на применяемую процедуру приготовления образцов, включающую нанесение на твердую подложку, высушивание и вакуумирование, практически все выросты имеют целостный характер, без видимых повреждений. В поле зрения вблизи бактерий отдельные изолированные от бактерий фрагменты выростов не обнаруживаются или наблюдается их незначительное количество, что указывает на высокую стабильность выростов. Разрушения выростов в процессе приготовления образцов и при последующем наблюдении в электронном микроскопе практически не происходило. Выросты идут непосредственно от края споры бактерии на удаление в 1–10 мкм. Эти факты также указывают на высокую механическую прочность выростов. Наблюдаемый диаметр канала выростов составляет величину около 1,5 нм.
Шаг спиралевидной упаковки – около 4 нм, наблюдаемый угол поворота спирали около 77 град., что соответствует углу поворота спирали по отношению к плоскости поперечного сечения в 13 град. При шаге спирали в 4 нм и диаметре выроста около 9 нм расчетное значение угла спирали также получается около 13 град. (рис.4c).
Согласно полученным данным, ранее неизученные штаммы B. cereus имеют типичные для этих бацилл споровые выросты. Эти штаммы различаются по количеству споровых выростов. Наименьшее количество выростов характерно для природных штаммов. Клинические изоляты имеют больше споровых выростов. Пилированность спор клинических изолятов выражена у разных штаммов по-разному. Преобладают тубулярные выросты.
Ранее мы показали, что у энтомопатогенных бацилл, родственных B. cereus, выросты этого типа ответственны за адгезию к эритроцитам и вызывают реакцию гемагглютинации [10]. Вероятно, что у B. cereus эти структуры выполняют сходную функцию.
Полученные результаты данной работы свидетельствуют о прочности выростов, что характерно для споровых структур. Устойчивость выростов к внешним воздействиям, очевидно, затрудняет процедуру очистки объектов окружающей среды от спор. Наряду с практической значимостью изучение выростов важно для понимания особенностей сборки и организации пилей грамположительных бактерий – нового класса наноструктур.
Работа Яминского И.В. выполнена при финансовой поддержке Российского научного фонда (проект № 20-12-00389), работа Ахметовой А.И. – при финансовой поддержке Российского фонда фундаментальных исследований (проекты № 20-32-90036 и № 21-58-10005).
ЛИТЕРАТУРА / REFERENCES
Bottone E.J. Bacillus cereus, a volatile human pathogene. Clinic. microbiol. reviews.; 23 (2010), pp. 382–398.
Hodgikiss W. 1971. Filamentous appendages on the spores and exosporium of certain Bacillus species, pp. 211–218. In A. Barker G. Gould, and J. Wolf (ed.), Spore research 1971. Academic Press, Inc., London, England.
DesRosier J.P., Lara J.C. Isolation and properties of pili from spores of Bacillus cereus. J. of Bacteriol. 145(1), (1981), pp. 613–619.
Smirnova T.A., Kulinich L.I., Galperin M.Yu., Azizbekyan R.R. Morphological characteristics and adhesive properties of Bacillus thuringiesis spore appendages. Mikrobiologiya. 58(5), (1989), pp. 835–840.
Pradhan B., Liedtke J., Sleutel M., Lindbäck T.L., Llarena A., Brynildsrud O., Aspholm M., Remaut H. Bacillus endospore appendages form a novel family of disulfide-linked pili. BioRxiv preprint (2020). doi: https://doi.org/10.1101/2020.08.21.260141.
Tauveron G., Slomianny C., Henry C., Faille C. Variability among Bacillus cereus strains in the spore surface properties and influence on their ability to contaminate food surface equipment. Int. J. Food Microbiol.110 (2006), pp. 254–262.
Akhmetova A.I., Yaminsky I.V. FemtoScan Online software for solving problems in biology and medicine. Medicine and High Technologies. No. 1, (2019), pp. 16–22, http://nanoscopy.ru/software/femtoscan_online/
Гросберг А.Ю., Хохлов А.Р. Статистическая физика макромолекул. М.: Наука, 1989.
Smirnova T.A., Kulinich L.I., Galperin M.Yu., Azizbekyan R.R. Subspecies-specific haemagglutination patterns of fimbriated bacillus thuringiensis spores. FEMS Microbiology Letters. 90 (1991), p. 1.
Отзывы читателей
